NEU
Legionellen Nachweis mittels qPCR
Legionellen sind humanpathogene Bakterien und können Infektionen der Atemwege (sog. Pneumonien) verursachen. Sie kommen im wässrigen Milieu vor und werden über Aerosole (z.B. Verneblung) übertragen.
Kommt es zu einer Legionellenvermehrung in technischen, wasserführenden Systemen wie zum Beispiel Trinkwasser- oder Verdunstungskühlanlagen, können Aerosole aus diesen belasteten Anlagen zur Infektion der Atemwege beim Menschen führen.
Um Vorbeugend zu wirken, besteht beispielsweise für Trinkwasseranlagen (Trinkwasserverordnung) und offene Verdunstungskühlanlagen (42. BImSchV) eine gesetzliche Untersuchungspflicht auf Legionella species.
Kultivierungsverfahren
Als zugelassenes Verfahren zum Nachweis von Legionellen wird gemäß DIN EN ISO 11731-2019-03 das Kultivierungsverfahren angewendet. Diese Verfahren gibt eine sehr lange Inkubation der Nährbodenplatte von 7-10 Tagen an, was der langsamen Vermehrung der Legionellen geschuldet ist. Muss eine Bestätigung verdächtiger Kolonien erfolgen, werden 2 weitere Inkubationstage nötig. Zudem kann vorliegende Begleitflora bei dem Kultivierungsverfahren das Ergebnis beeinflussen. Als Begleitflora bezeichnet man Bakterien, die in der zu untersuchten Proben vorliegen und das Wachstum der Legionellen stören können.
qPCR-Verfahren
Das qPCR-Verfahren beruht auf dem Nachweis Legionellen-spezifischer DNA Moleküle. Eine Vorbehandlung der Wasserproben gewährleistet, dass die tatsächliche Lebendzellzahl der Legionellen erfasst wird. DNA toter Legionellen wird durch Vorbehandlung der Proben reduziert.
Durch die hohe Spezifität der qPCR-Methode spielt der Einfluss von Begleitflora keine Rollen mehr.
Weiterhin entfällt die lange Inkubation des Kulturverfahrens, sodass die Ergebnisse mittels qPCR in wenigen Stunden vorliegen. Dies ermöglicht ein schnelles Reagieren auf einen akuten Legionellenausbruch oder liefert schnelle Ergebnisse um durchgeführte Maßnahmen zur Legionellen-Bekämpfung zu verifizieren. Die Angabe der Ergebnisse erfolgt in Genomkopien/Probenvolumen (z.B. GU/L)
Zusammengefasste Vorteile
- Ergebnisse innerhalb von 24 h (im Vergleich zum Kulturverfahren bis zu 12 Tage)
- Schnelles Vorliegen der Ergebnisse im Falle eines Legionellen Ausbruchgeschehens
- Schnelles Vorliegen der Ergebnisse zur Verifizieren von Maßnahmen zur Legionellen-Bekämpfung
- Hoch spezifische Methode somit kein Einfluss der Begleitflora auf das Ergebnis
- falsch-positive Ergebnisse werden sicher ausgeschlossen.
Die Analysen werden mit einem QuantStudio™ 5 Gerät der Firma Applied Biosystems durchgeführt.